HCT 116 (結(jié)腸癌細(xì)胞)

產(chǎn)品簡介
HCT 116 (結(jié)腸癌細(xì)胞) 的相關(guān)*：延胡索規(guī)格： 1g
587-63-3二氫醉椒;dihydrokavain 規(guī)格： 10mg
59-67-6煙規(guī)格： 20mg
白頭翁皂E-1 規(guī)格： HPLC≥98%,10mg/支;
136085-37-5黨參炔規(guī)格： HPLC≥98%;10mg
石菖蒲規(guī)格： 1.0g
546-97-4古倫賓;Columbin 規(guī)格： 20mg

產(chǎn)品廠地：上海市

更新時間：2025-02-26

廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商

訪問量：595

產(chǎn)品咨詢 15026555973

產(chǎn)品分類

技術(shù)文章

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品牌	其他品牌	貨號	GOY-01X0095
規(guī)格	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	產(chǎn)品僅供科研使用	應(yīng)用領(lǐng)域	化工

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號
HCT 116 (結(jié)腸癌細(xì)胞)	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶	GOY-01X0095

商品介紹：

名稱 HCT 116 (結(jié)腸癌細(xì)胞)

別稱HCT-116; HCT.116; HCT_116; HCT116; CoCL2

種屬人類

年齡（性別）男性，48歲

組織來源結(jié)直腸癌

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述HCT 116細(xì)胞是由M·Brattain等人于1979年從患結(jié)腸癌的男性病人中分離的三株惡性細(xì)胞中的一株。HCT 116細(xì)胞在半固體瓊脂糖培養(yǎng)基中形成克隆；HCT 116細(xì)胞在無胸腺裸鼠有致瘤性，形成腫瘤結(jié)節(jié)。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基McCoy’s 5A＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時間~25-48小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性Yes, in nude mice.

基因表達(dá)情況carcinoembryonic antigen (CEA) 1 ng per 1×10^6 cells per 10 days.

實(shí)驗要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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HCT 116 (結(jié)腸癌細(xì)胞) PEA瓊脂 HB7035 250g

1瓶 PC-3M-IE8細(xì)胞株 PC-3M-IE8 低溫運(yùn)輸和保存

萘啶酮酸 Nalidixic Acid 1.5mg/支*5

10g 幾丁質(zhì) Chitin 室溫干燥保存

500mL Zymogram Renaturation Buffer,10X Zymogram Renaturation Buffer,10X 常溫保存

5g DTT，蛋白級 DTT，Protein Grade -20℃保存

2 ug pBBR1-MCS4 pBBR1-MCS4 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

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