細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養瓶內，補加適量培養基，輕輕晃動培養瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態；

14.將細胞放回二氧化碳培養箱中靜置培養。

商品屬性：

人原代心臟微血管周細胞胞培養基由團隊精心優化，經過長期測試，本產品可保持人原代心臟微血管周細胞優良的生長狀態。

本產品中已包含人原代心臟微血管周細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于人原代心臟微血管周細胞的培養。

注意事項：

僅限科研用。

培養體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養體系的液體和有培養體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

公司正在出售的產品：

EpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule 0.5mgEpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮細胞粘附分子/表皮細胞粘附分子抗原

CALML3 Protein Human 重組人 CALML3 蛋白 (His 標簽)

HGF重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein

LTA4H Protein Mouse 重組小鼠 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 標簽)

IL23重組人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

大鼠胱硫醚β-合酶(CBS)試劑盒 ，英文名： CBS ELISA Kit

Rabbit collagen type III (Col III) ELISA Kit 兔子Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)試劑盒

百日咳桿菌(BP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMMP-2/GelatinaseAELISAKit大鼠基質金屬蛋白酶2/明膠酶A

體液基質金屬蛋白酶(MMP-2)免疫捕獲試劑盒20次

ELISAKitPSA犬前列腺特異性抗原

胰島素樣生長因子結合蛋白5   英文名稱：   human Insulin like Growth Factor Binding Protein 5   規格：      英文縮寫：   IGFBP5

胰島素   英文名稱：   Human Insulin   規格：      英文縮寫：   INS

細胞間粘附分子1   英文名稱：   Human Iercellular Adhesion Molecule 1   規格：      英文縮寫：   ICAM-1

干擾素α受體   英文名稱：   Human Ierferon α Receptor   規格：      英文縮寫：   IFNαR

鴨主要組織相容性復合體(MHC)ELISA 試劑盒

Human ai prothrombin aibody (aPT1/aPT2) ELISA Kit 人抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)試劑盒

HumanInsulieceptorβ,ISR-βELISAKIT 人胰島素受體β(ISR-β)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforACV-A(MouseActivinA)ELISAKit小鼠活化素A

血液組織蛋白酶L(CATHEPSINL)活性熒光定量試劑盒20次

MouseProgesterone,PROGELISAKit小鼠孕激素/孕同(PROG)試劑盒

α-(1,3)-巖藻糖基轉移酶 4

胰島素樣生長因子結合蛋白1抗體

人原代心臟微血管周細胞專用培養基HGF重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein

EpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule 0.5mgEpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮細胞粘附分子/表皮細胞粘附分子抗原

IL23重組人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

CALML3 Protein Human 重組人 CALML3 蛋白 (His 標簽)

LTA4H Protein Mouse 重組小鼠 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 標簽)

細胞培養步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養皿中，補加新鮮培養基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞凍存?：

選擇對數生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。