細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

人原代胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持人原代胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人原代胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于人原代胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

公司正在出售的產(chǎn)品：

白介素7(IL7)重組蛋白 Recombinant Interleukin 7 (IL7)

CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白

LILRB3重組小鼠 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 Protein

IL2RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL2RA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

GUCA1A重組人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

大鼠肺癌腫瘤抑制因子1(TSLC1)試劑盒 ，英文名： TSLC1 ELISA Kit

Porcine soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 豬可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒

豬特定基因序列(Porcine)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforMAO(Humanmonoamineoxidase)ELISAKit人單胺氧化酶

體液樣品組織蛋白酶B(CATHEPSINB)活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitSAA血清淀粉樣蛋白A

血濃度測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/48樣

血0濃度測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/48樣

血濃度測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/48樣

血清總鐵結(jié)合能力測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/48樣

小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai neuophil cytoplasmic aibody (cANCA) ELISA Kit 人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)試劑盒

HumansolublePhospholipaseA2,sPL-A2ELISAKit 人可溶性0脂酶A2(sPL-A2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforABeta1-42ELISAKit大鼠β淀粉樣蛋白1-42

乙四乙酸(EDTA)細(xì)胞脫離溶液100毫升

MouseMyosin,MYSELISAKit小鼠肌球蛋白(MYS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

P選擇素/白細(xì)胞內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子3抗體

KB抑制蛋白激酶β單克隆抗體

人原代胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基F11R重組小鼠 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein

ANPEN/CD13(Aminopeptidase N 0.5mgANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原

PA2G4重組人 EBP1 / PA2G4 蛋白 Protein

CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白

CD68 Protein Rat 重組大鼠 CD68 / Macrosialin 蛋白

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。