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PRODUCTS CENTER

產品中心

當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞大鼠腦微血管周細胞
大鼠腦微血管周細胞

產品簡介

大鼠腦微血管周細胞的相關*:小鼠中性粒細胞明膠相關脂質運載蛋白(NGAL)免疫試劑盒現貨供應
小鼠中性粒細胞彈性蛋白(NE)免疫試劑盒*直銷
小鼠脂氧素A4(LXA4)免疫試劑盒進口、組裝
小鼠脂聯素(ADP)免疫試劑盒進口、分裝
小鼠脂肪酸合成(FASN)免疫試劑盒現貨供應

產品廠地:上海市
更新時間:2025-02-20
廠商性質:經銷商
訪問量:409
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品牌其他品牌貨號GOY-01X1329
規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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產品屬性:   

產品名稱

規格

貨號

大鼠腦微血管周細胞

5×10?Cells/T25培養瓶

GOY-01X1329

商品介紹:

名稱    大鼠腦微血管周細胞   

2.組織來源:大腦組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠腦微血管周細胞分離自腦微血管;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。周細胞(pericyte)又稱Rouget細胞和壁細胞,是一種包圍全身毛細血管和靜脈中內皮細胞的細胞,可以收縮。周細胞嵌入毛細血管內皮細胞的基膜中,通過物理接觸和旁分泌信號與內皮細胞進行細胞通訊,監視和穩定內皮細胞的成熟過程。此外,周細胞還具有調控毛細血管血流量、細胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用,其多功能性是目前研究的熱點之一,所以對血管周細胞的生物學特征、標記物、細胞功能等的研究都為相關研究提供基礎資料。周細胞產生手指狀的外延以調控毛細血管的血流量。周細胞和內皮細胞之間共同擁有一個基膜,基膜上有多種細胞連接,包括多種整合素、神經鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細血管直徑的雙向調控;毛細血管受損時,周細胞還可增殖,分化為內皮細胞和成纖維細胞。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠腦微血管周細胞采用中性蛋白酶-膠原酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的大鼠腦微血管周細胞α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

包被條件PLL0.1mg/ml

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-R222

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態成纖維細胞樣

傳代特性可傳3-5代左右;3代以內狀態最佳

消化液0.25%胰蛋白酶

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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食蟹猴 LAMP2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

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食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 XEDAR / EDA2R 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠腦微血管周細胞一氧化氮合成-2(抗原)Anti-C6 Antibody侖氨西林Lenampicillin

蛇巴曲抗原Anti-CA1 Antibody利福霉素BRifamycin B

一氧化氮合成-3(抗原)Anti-CA12 Antibody6-青霉烷酸6- aminopenicillanic acid

神經肽 Y(抗原)Anti-CA12 Antibody鹽酸左Levofloxacin hydrochloride

谷受體(抗原)Anti-CA13 Antibody阿米卡星雜質AAmikacin?impurity A

神經生長因子-3(抗原)Anti-CA13 Antibody克拉維酸鉀Potassium clavulanate

神經生長因子4/5(抗原)Anti-CA13 Antibody鹽酸加替沙星Gatifloxacin hydrochloride

神經生長因子(抗原)Anti-CA14 Antibody頭孢孟多酯Cefamandole Nafate

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