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產品中心

當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞小鼠胰島β細胞
小鼠胰島β細胞

產品簡介

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產品廠地:上海市
更新時間:2025-02-19
廠商性質:經銷商
訪問量:422
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品牌其他品牌貨號GOY-01X1277
規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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產品屬性:   

產品名稱

規格

貨號

小鼠胰島β細胞

5×10?Cells/T25培養瓶

GOY-01X1277

商品介紹:

名稱    小鼠胰島β細胞   

2.組織來源:胰腺組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

小鼠胰島β細胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫鈉、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌生長抑素,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰島β細胞,即胰島B細胞,是胰島細胞的一種,屬內分泌細胞的一種,能分泌胰島素,與胰島α細胞分泌的胰高血糖素一起起到調節血糖的作用。胰島B細胞功能受損、胰島素分泌絕對或相對不足(胰島素抵抗),會使血糖升高,從而引發糖尿病。而胰島B細胞癌變會生成胰島素瘤,引起惡性血糖降低癥狀。

5.方法簡介:

實驗室分離的小鼠胰島β細胞采用先用膠原酶消化分離得到胰島、再用胰酶逐級消化胰島制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的小鼠胰島β細胞經Insulin含量檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

包被條件PLL0.1mg/ml

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-M200

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態梭形、多角形

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%胰蛋白酶

培養條件氣相:空氣,95%;CO25%

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠 AARS / alanyl-tRNA synthetase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 VEGF164 / VEGFA 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 SerpinB4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 PRL / Prolactin 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 PARP-3 / PARP3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 TH / Tyrosine Hydroxylase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 TERF1 / TRF1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 THOP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 SLPI 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠胰島β細胞無水鈉 CP,98%鋅標準溶液 100μg/mlAnti-arfaptin 2(phospho S260) /FITC  熒光素標記化ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體IgG

無水鈉 SP鋯標準溶液 1000μg/mlAnti-ARHI/FITC  熒光素標記ARHI蛋白抗體IgG

標準溶液 0.2500mol/L(0.5N)烯 CP,98.0%(劇品)Anti-ARIP2a/FITC  熒光素標記激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體IgG

無水鈉 99.99% metals basis烯 AR,99.0% (劇品)Anti-ARIP2B/FITC  熒光素標記激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體IgG

標準溶液 0.05000mol/L(0.1N)烯 分析標準品(劇品)Anti-Aromatase P450/FITC  熒光素標記芳香化蛋白抗體IgG

無水鈉 ACS, ≥99.0%莰烯  分析標準品Anti-Aromatase P450/FITC  熒光素標記芳香化/色素P450/P450抗體IgG

無水鈉 農殘級莰烯  75%Anti-ART/FITC  熒光素標記膠質系源性神經營養因子GDNF的一種抗體IgG

無水鈉 for HPLC,≥99.0% (T)莰烯  95%Anti-ASCL1/MASH1 /FITC  熒光素標記神經母特異性轉移因子抗體IgG

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