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產品中心

當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞小鼠肝非實質細胞
小鼠肝非實質細胞

產品簡介

小鼠肝非實質細胞的相關*:小鼠前列環素(PGI2)免疫試劑盒現貨供應
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產品廠地:上海市
更新時間:2025-02-16
廠商性質:經銷商
訪問量:454
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品牌其他品牌貨號GOY-01X1389
規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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產品屬性:   

產品名稱

規格

貨號

小鼠肝非實質細胞

5×10?Cells/T25培養瓶

GOY-01X1389

商品介紹:

名稱    小鼠肝非實質細胞   

2.組織來源:肝組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

小鼠肝非實質細胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用;肝臟也消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實質細胞具有肝功能的單位,是肝臟的基本組成單位之一。肝非實質細胞是指除了肝實質細胞之外的細胞,主要包含了肝竇內皮細胞、肝星狀細胞、肝枯否細胞。

5.方法簡介:

實驗室分離的小鼠肝非實質細胞采用取肝臟灌流、膠原酶消化、密度梯度離心法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的小鼠肝非實質細胞經過檢測,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-M304

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性懸浮

細胞形態圓形

傳代特性不增殖;不傳代

消化液0.25%胰蛋白酶

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠 MANF / ARMET 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 SPINK4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 VNN1 / Vanin-1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 IL1R1 / CD121a 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 Lactotransferrin / LTF 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 SCN3B 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 NRG1-alpha (ECD) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠肝非實質細胞糖原 ≥90% 苯甲 AR,>98.5%(GC)Anti-Phospho-LKB1 (Thr189) /FITC  熒光素標記化/蛋白激抗體IgG

甘油 for molecular biology, ≥99%2-叔丁基 99%Anti-LN /FITC  熒光素標記層粘連蛋白抗體IgG

甘油 無菌,for molecular biology, ≥99%2,4-二叔丁基酚 97%Anti-Integrin alpha 4,beta 7(LPAM-1)/FITC  熒光素標記整合素α4β7抗體IgG

纖維素 80~125mpa.s,25℃ 2,6-二叔丁基酚 98%Anti-HRH3/GPCR97/FITC  熒光素標記組織H3受體抗體IgG

順式-4-羥基-L-脯 98%2,4,6-三叔丁基酚 99%Anti-HRH4/GPCR105/FITC  熒光素標記組織H4受體抗體IgG

羥賴 97%  AR,99.0%Anti-LOX-1/OLR1/FITC  熒光素標記凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體抗體IgG

潮霉素B溶液 50mg/ml溶液 ACSAnti-Lpin1 protein/FITC  熒光素標記Lpin1 抗體IgG

潮霉素B 超純級 99.99% metals basisAnti-Lpin1 protein/FITC  熒光素標記Lpin1 抗體IgG

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